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氨基酸態(tài)氮,指的是以氨基酸形式存在的氮元素的含量,是判定發(fā)酵產(chǎn)品發(fā)酵程度的特性指標。該指標之所以不達標,或由于生產(chǎn)工藝不符合標準要求,或產(chǎn)品配方缺陷,或產(chǎn)品與已制定指標不匹配等原因造成。該指標越高,說(shuō)明醬油中氨基酸含量越高,鮮味越好。釀造醬油通過(guò)氨基酸態(tài)氮含量可區別其等級,每百毫升的氨基酸態(tài)氮所含克數含量越高,品質(zhì)越好。一般來(lái)說(shuō),特級、一級、二級、三級醬油的氨基酸態(tài)氮含量分別為≥0.8、≥0.7、≥0.55、≥0.4g/100ml。

氨基酸態(tài)氮的執行標準有《釀造醬油》(GB/T 18186—2000)、《配制醬油》(SB/T 10336—2012)、產(chǎn)品明示標準及質(zhì)量要求。

氨基酸態(tài)氮的測定——酸度滴定法

1.原理

根據氨基酸的兩性作用,加入甲醛以固定氨基的堿性,使羧基顯示出酸性。用氫氧化鈉標準溶液滴定,以酸度計定終點(diǎn)。 —COOH被完全中和時(shí),pH值約為8.5~9.5。本法準確快速,可用于各類(lèi)樣品游離氨基酸含量測定。

2.儀器

①酸度計。

②磁力攪拌器。

③微量滴定管(10 mL)。

3.試劑

①36%甲醛溶液。

②0.05mol·L-1氫氧化鈉標準溶液,標定后使用。

4.操作步驟

①確吸取5.O mL液體樣品,置于100 mL容量瓶中,加水至刻度,混勻。

②吸取20.0 mL上述樣品稀釋液于200 mL燒杯中,加水60 mL,開(kāi)動(dòng)磁力攪拌器,用O.05 mol·L-1NaOH標準溶液滴定至酸度計指示為pH=8.2(記下消耗氫氧化鈉溶液的體積,可用于計算總酸含量)。

③加入10.O mL甲醛溶液,混勻。再用0.05 mol·L-1叫NaOH標準溶液繼續滴定至pH=9.2,記錄消耗標準溶液的體積(V1)。

取80 mL水,在同樣條件下做試劑空白試驗,記錄消耗標準溶液的體積(V0)。

5.計算

X=[c×(V1﹣V0)×0.014] ÷[5×(V/100)×100     

式中:X——樣品中氨基酸態(tài)氮的質(zhì)量分數,%;

V1——樣品稀釋液在加入甲醛后滴定至終點(diǎn)(pH=9.2)所消耗氫氧化鈉標準溶液的體積;

V0——空白試驗加入甲醛后滴定至終點(diǎn)所消耗氫氧化鈉標準溶液的體積;

V——滴定時(shí)吸取樣品稀釋液體積,mL;

c——氫氧化鈉標準溶液濃度,mol·L-1。

5——測定用液體樣品毫升數。

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