食品微生物學(xué)檢測技術(shù)

食品微生物學(xué)檢驗是運用微生物學(xué)的理論與技術(shù)，按照相應的檢驗方法檢測食品中微生物的種類(lèi)和數量，并根據國家微生物限量標準，評價(jià)食品衛生、質(zhì)量與安全的一門(mén)應用性學(xué)科。GB 4789.1《食品安全國家標準 食品微生物學(xué)檢驗 總則》規定了食品微生物學(xué)檢驗基本原則和要求，其適用于所有食品的微生物學(xué)檢驗。

?一、實(shí)驗室基本要求

1、檢驗人員，微生物檢驗應由具有相應的微生物專(zhuān)業(yè)教育或培訓經(jīng)歷，掌握包括常規微生物檢測、無(wú)菌操作、消毒知識、生物防護等相關(guān)的知識和專(zhuān)業(yè)技能，并具備相應檢驗資質(zhì)的人員實(shí)施檢驗。

2、環(huán)境與設施，食品微生物檢驗應在潔凈區域進(jìn)行。潔凈區域的級別應按照GB 50687《食品工業(yè)潔凈用房建筑技術(shù)規范》中“附錄A 食品生產(chǎn)良好衛生生產(chǎn)環(huán)境”中規定的 “Ⅱ級背景下的Ⅰ級”，即傳統意義上10000級背景下的100級。病原微生物的分離鑒定工作應在二級或以上生物安全實(shí)驗室進(jìn)行，生物安全實(shí)驗室應按照GB 50346《生物安全實(shí)驗室建設技術(shù)規范》設計和施建，并符合《中華人民共和國生物安全法》(草案)、GB 19489《實(shí)驗室 生物安全通用要求》等要求，以保證人員與環(huán)境的生物安全。

3、實(shí)驗設備，實(shí)驗室應配備滿(mǎn)足檢測工作要求的儀器設備，如天平、培養箱、水浴鍋、冰箱、均質(zhì)器、顯微鏡、生物安全柜等。其中培養箱的配置應考慮到用途、控溫范圍、控制精度和數量的要求。對結果有重要影響的儀器的關(guān)鍵量或值，如培養箱溫度及其均勻性和穩定性等指標要求，應納入設備的校準/檢定計劃，并保證校準/檢定設備的修正因子/誤差得到及時(shí)更新和正確使用。

4、檢驗用品，無(wú)菌采樣容器、試管、平皿、錐形瓶等在使用前應保持清潔和/或無(wú)菌。無(wú)菌工器具和器皿應有明顯標識以與非無(wú)菌工器具和器皿加以區別。

5、培養基和試劑，培養基和試劑的制備和質(zhì)量要求按照GB 4789.28的規定執行。

6、質(zhì)控菌株，實(shí)驗室必須保存有滿(mǎn)足試驗需要的標準菌種/菌株，除檢測方法中規定的菌種外，還應包括應用于培養基（試劑）驗收/質(zhì)量控制、方法確認/證實(shí)、陽(yáng)性對照、陰性對照、人員培訓考核和結果質(zhì)量的保證等所需的菌株。標準菌株應可溯源至微生物菌種保藏專(zhuān)門(mén)機構或專(zhuān)業(yè)權威機構。

二、樣品的采集

1、采樣原則，采樣是食品檢驗過(guò)程中首要而且極其重要的環(huán)節，其對檢驗的結果的有效性有著(zhù)直接影響。因微生物分布的不均勻性，采樣應遵循隨機性和代表性的原則，過(guò)程遵循無(wú)菌操作程序，防止一切可能的外來(lái)污染。

2、采樣方案，根據檢驗目的、食品特點(diǎn)、批量、檢驗方法、微生物的危害程度等確定采樣方案。采樣方案分為二級和三級采樣方案。二級采樣方案設有n（同一批次產(chǎn)品應采集的樣品件數）、c（最大可允許超出m值的樣品數）和m值［微生物指標可接受水平限量值(三級采樣方案)或最高安全限量值(二級采樣方案)］，三級采樣方案在二級采樣方案的基礎上設有M值（微生物指標的最高安全限量值）。對于沙門(mén)氏菌、單核細胞增生李斯特氏菌、大腸埃希氏菌O157:H7等危害程度高的微生物，GB 29921《食品安全國家標準 食品中致病菌限量》中規定均為二級采樣方案：n=5，c=0，m=0。對于金黃色葡萄球菌和副溶血性弧菌危害程度較低的微生物，GB 29921規定均為三級采樣方案，如水產(chǎn)制品中金黃色葡萄球菌和副溶血性弧菌限量標準均為：n=5，c=1，m=100 CFU/g，M=1000 CFU/g，含義是從一批產(chǎn)品中采集5個(gè)樣品，若5個(gè)樣品的檢驗結果均小于或等于m值(≤100 CFU/g)，則這種情況是允許的；若≤1個(gè)樣品的結果(X)位于m值和M值之間(100 CFU/g。